常见的pcr添加剂（常见的pcr添加剂有哪些）

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本文目录一览：

• 1、pcr扩增用的试剂有哪些?
• 2、PCR反应中各种添加剂的作用
• 3、PCR体系中各成分的作用以及程序的设计

pcr扩增用的试剂有哪些?

一些共溶剂和添加剂能够降低错误率，提高扩增效率。共溶剂有甲酰胺（25-10%，v/v）、二甲基亚砜（最高可到15%，v/v）及甘油（1%-10%，v/v）。添加剂包括氯化四甲铵、谷氨酸钾、硫酸铵。

需要购买的 做pcr扩增用的试剂： PCRmix，或者酶，dntp等，电泳的试剂：胶，buffer，核酸染料，marker。如果做荧光定量或者测序，需要荧光修饰的引物，还得合成。耗材：pcr板，吸头，pcr管。还有很多别的东西。

包括各种DNA的常用试剂，产物检测试剂，在临床上应用比较广泛，包括琼脂糖，聚丙烯酰胺凝胶等，PCR扩增试剂，这种方法操作起来比较简单，主要是用DNA聚合酶，缓冲试剂，引物，4种碱基等，来进行各方面的检测。

需要1 缓冲液（分为含二价Mg和不含的，不含的就还要MgCl2）2 dNTP 3 引物 4 模板 5 酶 如果你买MIX的话，就只需要MIX，模板以及引物。

pcr需要的原料有：物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA***的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液。

PCR反应中各种添加剂的作用

1、BUFFER 作用主要是稳定PCR过程中的PH。用于PCR的标准级冲液的主要成分，其中二价镁离子的存在与否至关重要。镁离子浓度可直接关系DNA聚合敌的活性和DNA双链的解链温度，因此对反应的特异性及产证有显著影响。

2、加入DMSO利于减少DNA的二级结构，使G、C含量高的模板易于完全变性，在反应体系中加入DMSO使PCR产物直接测序更易进行。

3、Buffer：主要是用来控制体系的pH和离子，为DNA聚合酶提供最佳工作环境。cDNA：cDNA是逆转录出来的DNA，主要是用来将mRNA变为单链DNA，作为PCR的模板。

4、一些共溶剂和添加剂能够降低错误率，提高扩增效率。共溶剂有甲酰胺（25-10%，v/v）、二甲基亚砜（最高可到15%，v/v）及甘油（1%-10%，v/v）。添加剂包括氯化四甲铵、谷氨酸钾、硫酸铵。

5、促进核酸骨架的形成。Mgcl2和硫酸镁在pcr的作用主要是促进核酸骨架的形成，影响聚合酶的4活性。Mgcl2浓度过高会降低扩增特异性，浓度过低影响扩增产量。

PCR体系中各成分的作用以及程序的设计

PCR反应体系由寡核苷酸(引物)、4 种dNTP、Taq DNA聚合酶、靶序列DNA和PCR反应缓冲液体系组成。设计PCR引物时的一般原则：(1)引物长度一般15~ 30碱基，过短则特异性低； 过长则会引起引物间的退火而影响有效扩增。

Mg2+：增加特异性 酶及buffer：催化反应 PCR反应程序：变性，退火，延伸。一般来说，94度变性；退火温度依你的引物而定，延伸时间依你使用的酶及片段大小而定。

PCR就是聚合酶链式反应。再外界情况下完成对核算片段的迅速合成。主要成分：有两端引物，Taq DNA聚合酶 模板DNA 合成DNA的核苷酸。主要程序：1。模板DNA的变性，两条链解开。2。引物模板退火，二者碱基配对 3。

Buffer：主要是用来控制体系的pH和离子，为DNA聚合酶提供最佳工作环境。cDNA：cDNA是逆转录出来的DNA，主要是用来将mRNA变为单链DNA，作为PCR的模板。

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